1.病原菌分离培养:采用PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂),培养温度251℃,暗培养7-14天观察菌丝形态及子实体特征
2.分子生物学检测:ITS-rDNA序列扩增(引物ITS1/ITS4),PCR产物测序比对NCBI数据库
3.土壤理化分析:pH值(电极法0.1精度)、电导率(EC值≤4.0mS/cm)、有机质含量(重铬酸钾氧化法)
4.根系活力测定:TTC法(氯化三苯基四氮唑)染色量化脱氢酶活性
5.抗病性评估:离体接种试验(菌饼直径5mm),病斑扩展速率测量(mm/24h)
1.苹果树病根样本(直径≥3mm新生褐变根系)
2.根际土壤(深度20-50cm土层混合样)
3.果园灌溉水样(过滤孔径0.45μm膜预处理)
4.砧木材料(M9/M26/T337等嫁接接口部位)
5.农药残留样本(多菌灵/代森锰锌等杀菌剂HPLC检测)
1.ISO16140-3:2022《分子生物学方法验证规程》用于病原菌特异性基因检测
2.ASTMD2974-20e1《泥炭材料测试标准》规范有机质含量测定
3.GB/T36839-2018《林木病原菌分离鉴定技术规程》指导菌株纯化流程
4.NY/T1121.14-2021《土壤pH的测定》规定电极校准标准
5.SN/T1840-2016《植物病原真菌实时荧光PCR检测方法》建立快速诊断体系
1.PCR扩增仪(Bio-RadT100ThermalCycler):程序化控制退火温度58℃0.5℃
2.超净工作台(苏净SW-CJ-2FD):垂直层流风速0.3m/s20%
3.倒置显微镜(OlympusIX73):400相衬观察菌丝锁状联合结构
4.冷冻离心机(Eppendorf5430R):最大转速30,000rpm保持RNA完整性
5.全自动酶标仪(ThermoMultiskanSkyHigh):450nm波长测定TTC还原量
6.离子色谱仪(DionexICS-600):电导检测器分辨率≤0.1nS/cm
7.超低温冰箱(HaierDW-86L626):-80℃2℃长期保存菌种资源
8.土壤紧实度仪(FIELDSCOUTSC900):探头压力范围0-700kPa误差3%
9.超纯水系统(Milli-QAdvantageA10):产水电阻率18.2MΩcm@25℃
10.生物安全柜(ESCOAirstreamACB-4E):HEPA过滤器效率99.99%@0.3μm
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
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