细胞凋亡检测

检测项目

形态学检测：

• 细胞核染色：核碎裂指数(≥20%，参照ISO10993-5)、细胞收缩率(变化率)
• 膜通透性：碘化丙啶阳性率(PI+%，阈值≤5%)

生化标志物检测：

• Caspase活性：Caspase-3活性(U/mg蛋白，参照ASTMF1980)，Caspase-9活性(U/mg蛋白)
• Bcl-2家族蛋白：Bax/Bcl-2比值(相对表达量±0.05)

流式细胞术检测：

• AnnexinV结合：早期凋亡率(AV+/PI-%)，晚期凋亡率(AV+/PI+%)
• 细胞周期分析：Sub-G1峰比例(≥10%)

DNA损伤检测：

• TUNEL法：DNA片段化指数(TUNEL+%，参照GB/T16886.11)、彗星试验尾长(μm)
• 电泳分析：DNAladder条带清晰度(评级标准)

Caspase通路检测：

• 酶活性测定：Caspase-8活性(U/mg蛋白)，Caspase-12活性(U/mg蛋白)
• 激活剂检测：PARP切割率(百分比变化)

线粒体功能检测：

• 膜电位变化：JC-1染色红绿比(比值≤0.8)、ROS水平(荧光强度)
• 细胞色素C释放：胞浆浓度(ng/mL)

膜联蛋白检测：

• 磷脂酰丝氨酸外翻：AnnexinV-FITC阳性率(阈值≥15%)
• 膜完整性：乳酸脱氢酶漏出率(LDH释放%)

细胞因子相关检测：

• TNF-α诱导：凋亡诱导率(变化倍数)，Fas受体表达(MFI值)
• 凋亡抑制因子：Survivin表达量(相对单位)

Westernblot验证：

• 蛋白表达：p53蛋白水平(灰度值)，Bid切割产物(条带强度)
• 磷酸化状态：p-Akt活性(比值±0.1)

高通量筛查：

• 微孔板检测：细胞活力抑制率(IC50值，单位μM)，凋亡指数(综合评分)
• 自动化分析：凋亡细胞计数(个/视野)

检测范围

1.哺乳动物细胞培养物：涵盖HEK293、HeLa等细胞系，检测重点为药物诱导凋亡的剂量响应和形态学变化

2.癌细胞系样本：包括A549、MCF-7等肿瘤细胞，侧重化疗药物敏感性及凋亡通路激活机制

3.组织切片样本：来自肝脏、肾脏等器官，检测重点为原位TUNEL染色和病理评分

4.血液和体液样本：如外周血单核细胞，检测重点为淋巴细胞凋亡率和AnnexinV流式分析

5.干细胞和祖细胞样品：涵盖间充质干细胞，检测重点为分化相关凋亡及线粒体功能

6.植物细胞样品：如拟南芥叶片，检测重点为环境胁迫下DNA片段化和Caspase类似酶活动

7.转基因细胞模型：如过表达凋亡基因细胞，检测重点为基因修饰对凋亡标志物影响

8.药物筛选样本：应用于抗肿瘤化合物库，检测重点为高通量凋亡抑制率及IC50计算

9.感染模型细胞：如病毒感染HeLa细胞，检测重点为病原体诱导凋亡及免疫逃逸机制

10.临床活检样本：来自肿瘤组织，检测重点为凋亡相关蛋白表达与预后关联

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009体外细胞毒性试验方法(适用于凋亡评估，强调细胞形态学参数)
• ASTMF1980-21细胞凋亡流式检测标准(规范AnnexinV/PI双染流程)
• ISO21427-2:2006DNA损伤彗星试验方法(针对凋亡相关DNA片段化)

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分(涵盖细胞凋亡试验，采用LDH漏出法)
• GB/T37869-2019细胞凋亡检测技术规范(整合TUNEL和Westernblot，差异为样本处理温度控制)
• GB/T39730-2020流式细胞术检测指南(强调凋亡细胞百分比计算，与国际标准差异在荧光染料选择)

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCalibur型(检测通道488nm/640nm，灵敏度0.1%)

2.荧光显微镜：OlympusBX53型(物镜100×，分辨率0.2μm)

3.酶标仪：TecanInfiniteM200型(波长范围200-1000nm，精度±0.01OD)

4.PCR仪：AppliedBiosystems7500型(温控精度±0.1℃，升降温速率4℃/s)

5.电泳系统：Bio-RadPowerPacBasic型(电压范围10-300V，恒定电流模式)

6.离心机：Eppendorf5430R型(转速范围100-15000rpm，最大RCF21500×g)

7.细胞计数器：CountessIIFL型(检测范围10^4-10^7细胞/mL，精度±1%)

8.分光光度计：ShimadzuUV-1800型(波长精度±0.5nm，带宽2nm)

9.微孔板阅读器：PerkinElmerEnVision型(检测模式双荧光，动态范围4log)

10.成像系统：LeicaDFC7000T型(CCD分辨率500万像素，曝光时间1ms-60s)

11.恒温培养箱：ThermoScientificHeracell150i型(温度范围4-50℃，CO2控制±0.1%)

12.超净工作台：EscoAirstream型(风速0.3-0.6m/s，洁净度100级)

13.细胞培养箱：MemmertINCOmed型(湿度控制90-95%，温度稳定性±0.2℃)

14.低温离心机：BeckmanCoulterAllegraX-30R型(温控范围-20-40℃，最大容量6×85mL)

15.荧光偏振仪：BMGLabtechCLARIOstar型(检测动态范围0-500mP，精度±0.5mP)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于细胞凋亡检测相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

上一篇：医用雾化机检测
下一篇：亲水性高分子材料检测

本文地址：https://www.beijianceshi.com/bjcs-info/25784.html