细胞DNA损伤检测

检测项目

DNA链断裂检测：

• 单链断裂检测：断裂频率(每百万碱基断裂数)，迁移指数(彗星尾部DNA%≥10%)
• 双链断裂检测：γ-H2AX焦点计数(>5焦点/细胞)，末端标记阳性细胞率(≥15%)
• 复合断裂检测：断裂复合度评分(1-5级，参照ISO21427-2)

氧化损伤检测：

• 8-氧代鸟嘌呤检测：8-oxoG浓度(μg/mgDNA)，氧化修饰率(≥0.5%)
• 脂质过氧化相关损伤：MDA-DNA加合物水平(nmol/mg)
• ROS诱导损伤：超氧化物歧化酶活性(U/mg蛋白)

碱基修饰检测：

• 脱嘌呤/脱嘧啶位点：AP位点密度(每105碱基)
• 甲基化损伤：5-甲基胞嘧啶含量(%变化±2%)
• 烷基化损伤：O6-甲基鸟嘌呤水平(pg/μgDNA)

紫外线损伤检测：

• 环丁烷二聚体检测：CPD阳性细胞率(≥20%)，光解酶修复效率(%)
• 6-4光产物检测：损伤位点计数(每细胞≥10点)
• UVR敏感性：半数致死剂量(LD50，mJ/cm2)

辐射损伤检测：

• 电离辐射损伤：DSBs焦点密度(γ-H2AX，焦点/μm2)
• 中子辐射检测：染色体畸变率(%畸变细胞≥5%)
• 修复动力学：修复半衰期(t1/2≤30分钟)

化学诱导损伤检测：

• 烷化剂损伤：突变频率(突变/106细胞)
• 交联剂检测：DNA交联指数(交联%≥1)
• 氧化剂响应：谷胱甘肽还原酶活性(nmol/min/mg)

凋亡相关损伤检测：

• DNA片段化检测：梯状条带强度(AU≥500)，TUNEL阳性率(%)
• Caspase激活：Caspase-3活性(RFU/min)
• 端粒损伤：端粒长度缩短(kb损失≥0.5)

修复机制检测：

• 碱基切除修复：OGG1酶活性(U/mg蛋白)
• 核苷酸切除修复：XP蛋白表达量(ng/mL)
• 错配修复：MSH2蛋白缺陷评分(0-3级)

表观遗传损伤检测：

• 组蛋白修饰：H2AX磷酸化水平(吸光度OD值)
• DNA甲基化异常：甲基化密度变化(%±0.5)
• 非编码RNA损伤：miRNA表达差异(foldchange≥2)

微生物模型检测：

• 细菌SOS响应：RecA蛋白诱导(倍数变化≥3)
• 酵母损伤模型：存活率下降(%≤50)
• 噬菌体检测：DNA包装缺陷率(%≥10)

检测范围

1.人类体细胞：包括外周血淋巴细胞和成纤维细胞，重点检测环境毒素如苯并芘诱导的氧化损伤和链断裂。

2.实验动物细胞：涵盖小鼠肝细胞和大鼠神经元，侧重辐射暴露和化疗药物引起的DNA双链断裂及修复效率。

3.植物细胞：如拟南芥叶肉细胞，检测紫外线辐射和重金属污染导致的碱基修饰和光产物积累。

4.癌细胞系：包括HeLa和MCF-7细胞，重点评估抗癌药物诱导的凋亡相关DNA片段化和端粒损伤。

5.干细胞模型：胚胎干细胞和iPSC，检测分化过程中的表观遗传损伤和甲基化异常。

6.微生物细胞：如大肠杆菌和酵母，评估化学诱变剂引起的SOS响应和碱基错配。

7.环境样本细胞：水生生物如藻类细胞，检测工业污染物如多环芳烃导致的氧化损伤和交联。

8.食品源性细胞：如发酵微生物，侧重食品添加剂诱导的DNA烷基化和修复缺陷。

9.临床活检样本：肿瘤组织细胞，重点分析放疗后γ-H2AX焦点形成和修复动力学。

10.工程化细胞：基因编辑细胞如CRISPR模型，检测脱靶效应引发的单链断裂和突变频率。

检测方法

国际标准：

• ISO21427-2:2006体外细胞遗传毒性检测方法(彗星试验)
• ISO10993-3:2014医疗器械生物学评价-基因毒性检测
• OECDTG489体内彗星试验指南
• ICHS2(R1)药物基因毒性测试指南

国家标准：

• GB/T16886.3-2019医疗器械生物学评价-遗传毒性检测
• GB15193.3-2014食品安全性毒理学评价-遗传毒性试验
• GB/T39229-2020细胞DNA损伤彗星试验方法
• GB5009.XXX-202X食品中DNA损伤检测方法

方法差异说明包括国际ISO标准侧重体外模型灵敏度(检测限低至0.1%损伤)，而国家标准GB/T更强调体内应用和样本量要求(最小细胞数≥5000)。国际OECD指南注重修复动力学参数，GB标准则强化环境样本适用性。ISO方法使用荧光标记定量，GB方法常结合比色法，导致分析偏差±5%。ICH标准针对药物开发，引入修复酶活性校准，GB标准省略此步，节省时间但精度略低。

检测设备

1.荧光显微镜：OLYMPUSBX53型(放大倍数1000X，分辨率0.2μm，激发波长488nm)

2.流式细胞仪：BDFACSCantoII型(流速60μL/min，检测通道14个，灵敏度0.1%)

3.实时PCR仪：ThermoFisherQuantStudio7型(动态范围1010，温度精度±0.1°C，通量96孔)

4.彗星分析系统：CometScorePro2.0型(图像分析速度50样本/小时，迁移指数误差±2%)

5.微孔板读数仪：BioTekSynergyH1型(波长范围200-999nm，吸光度精度±0.005OD)

6.离心机：Eppendorf5430R型(最大转速15000rpm，温度控制±1°C，容量24×1.5mL)

7.电泳系统：Bio-RadPowerPacBasic型(电压范围10-300V，凝胶尺寸10×10cm)

8.酶标仪：TecanInfiniteM200型(检测模式荧光/发光，动态范围6logs，通量384孔)

9.细胞培养箱：ThermoScientificHeracell150i型(CO2控制±0.1%，温度稳定性±0.2°C，湿度90%)

10.超微量分光光度计：NanodropOne型(样本体积1μL，波长精度±1nm，DNA浓度范围2-15000ng/μL)

11.低温存储箱：HaierDW-86L338型(温度范围-86°C，稳定性±2°C，容量338L)

12.生物安全柜：ESCOAC2-4S1型(气流速度0.5m/s，HEPA过滤效率99.99%，噪音≤65dB)

13.振荡培养箱：NewBrunswickInnova42型(转速50-300rpm，温度范围室温至80°C，容量25L)

14.显微镜摄像头：LeicaDFC450型(分辨率5MP，帧率30fps，接口USB3.0)

15.自动化移液系统：HamiltonMicrolabSTAR型(精度±0.5%，体积范围0.5-1000μL，通量96孔/分钟)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于细胞DNA损伤检测相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

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