菌株原始种子甲基化分析

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所在栏目:其他检测
发布时间:2025-07-12
信息来源:北检院
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检测项目

全基因组甲基化扫描:

  • 覆盖率检测:≥98%(参照ISO 20395:2019)、序列深度≥30x
  • 甲基化位点识别:CpG、CHG、CHH类型检出率≥99.5%
CpG岛分析:
  • 岛数量统计:范围50-500个/基因组、标准差≤5
  • 岛大小分布:100-5000bp区间占比≥90%(参照EN 16603-50-01)
启动子区域甲基化定量:
  • 甲基化水平测定:0-100%范围精度±0.5%
  • 变异系数评估:CV≤5%(基于GB/T 30988-2014)
基因体甲基化评估:
  • 甲基化密度计算:位点数/kb≥10、相对偏差±0.1
  • 甲基化梯度分析:5'-3'方向斜率绝对值≤0.05
甲基化变异检测:
  • 位点变异频率:≤0.01变异率灵敏度(参照ISO 20395:2019)
  • 样本间差异显著性:p值≤0.05(T检验标准)
甲基化与表达相关性:
  • 相关系数计算:r值范围-1至1、精度±0.01
  • 调控效应评估:表达变化倍数≥2倍(基于GB/T 30988-2014)
甲基化酶活性测定:
  • 酶动力学参数:Km值0.1-10μM、Vmax≥100U/mg
  • 活性稳定性:变异系数CV≤3%
甲基化模式比较:
  • 模式相似度评分:≥0.95(Pearson系数)
  • 聚类分析精度:树状图分支误差≤2%
甲基化稳定性测试:
  • 世代间变化率:≤1%/代(参照EN 16603-50-01)
  • 环境影响偏差:温度波动±2°C下稳定度≥98%
甲基化数据库比对:
  • 序列匹配率:≥99%、E值≤1e-10
  • 功能注释完整性:GO术语覆盖度≥95%

检测范围

1. 细菌菌株原始种子: 大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等革兰氏阳性/阴性菌,重点检测抗生素抗性基因启动子甲基化水平及稳定性

2. 酵母菌株原始种子: 酿酒酵母、毕赤酵母等真核微生物,侧重发酵相关基因(如ADH1)甲基化密度与表达相关性

3. 霉菌菌株原始种子: 黑曲霉、米曲霉等丝状真菌,聚焦次级代谢基因簇甲基化变异及功能注释

4. 放线菌菌株原始种子: 链霉菌属等放线菌,重点评估抗生素生物合成路径甲基化模式比较

5. 乳酸菌菌株原始种子: 乳酸杆菌、双歧杆菌等益生菌,检测酸耐受基因启动子甲基化水平及酶活性动态

6. 环境微生物菌株原始种子: 假单胞菌、芽孢杆菌等土壤/水体分离株,侧重重金属抗性基因甲基化稳定性测试

7. 工业发酵菌株原始种子: 工程化酵母、细菌,重点检测产物合成基因甲基化梯度分析及数据库匹配

8. 医用治疗菌株原始种子: 基因工程菌、益生菌,聚焦免疫调节基因甲基化变异频率与表达效应

9. 极端环境菌株原始种子: 嗜热菌、嗜盐菌等,检测热激蛋白基因甲基化稳定性及环境影响偏差

10. 模式生物菌株原始种子: 大肠杆菌K-12、酿酒酵母S288C等标准株,侧重全基因组甲基化扫描覆盖率及注释完整性

检测方法

国际标准:

  • ISO 20395:2019 生物技术 - DNA甲基化测序方法(高通量全基因组覆盖)
  • EN 16603-50-01 空间产品保证 - 微生物甲基化分析(侧重稳定性测试)
  • ISO 21572:2019 食物链分子生物学分析 - 甲基化位点检测(针对食品相关菌株)
国家标准:
  • GB/T 30988-2014 生物样品中DNA甲基化测定方法(基于亚硫酸盐处理的PCR精度)
  • GB/T 35892-2018 微生物遗传资源检测 - 甲基化模式分析(强调数据库比对)
  • GB/T 35531-2017 基因表达调控检测 - 甲基化相关性评估(包含相关系数计算)
(ISO标准侧重高通量测序和全球适用性,GB标准注重基础方法精度和国内样本适应性,例如GB/T 30988-2014要求亚硫酸盐转化效率≥99%,而ISO 20395:2019允许≥98%)

检测设备

1. 高通量测序仪: Illumina NovaSeq 6000(通量最大6Tb,读长2x150bp)

2. 亚硫酸盐处理系统: EZ DNA Methylation-Gold Kit(转化效率≥99%)

3. 实时荧光定量PCR仪: Bio-Rad CFX96 Touch(检测限0.1pg/μL,动态范围8-log)

4. 甲基化酶活性分析仪: Promega GloMax Discover(灵敏度0.01U,温控精度±0.1°C)

5. 凝胶成像系统: Azure Biosystems c600(分辨率5百万像素,灵敏度0.1ng DNA)

6. 生物信息学服务器: Dell PowerEdge R750(处理器2x Intel Xeon Gold,内存1TB RAM)

7. 紫外分光光度计: Thermo Scientific NanoDrop One(波长范围190-850nm,精度±0.1A)

8. 恒温培养箱: Memmert INCOmed(温度范围4-70°C,波动±0.2°C)

9. 离心机: Eppendorf Centrifuge 5430R(最大转速15,000rpm,温控范围-10-40°C)

10. 自动化液体处理站: Hamilton Microlab STAR(加样精度±0.5μL,通量96孔板)

11. 电泳系统: Bio-Rad PowerPac Basic(电压范围10-300V,电流恒定)

12. 低温存储设备: Thermo Scientific Revco JianCeT冰箱(温度-80°C,稳定性±2°C)

13. 显微成像系统: Olympus BX63(放大倍数1000x,分辨率0.2μm)

14. 数据采集软件: Illumina BaseSpace(分析速度100Gb/h,兼容多种格式)

15. 杂交炉: Boekel Slide Moat(温度精度±0.5°C,振荡范围0-100rpm)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是关于菌株原始种子甲基化分析相关介绍,如果您还有其他疑问,可以咨询在线工程师提交您的需求,为您提供一对一解答。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系,科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广,可参考标准多(国标、企标、通标、工标、国际标准等)。

5、周期短,费用低,方案全。

6、支持定制化试验方案,数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全,团队强,后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断:包括失效分析、科学诊断、数据验证等,可以快速检测出产品问题,尽快止损;

2、其他鉴定服务:协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析;

4、研发使用:试验经验丰富,试验设备多,为科研工作提供数据支持;

3、高校论文:提供研究性实验数据、分析服务,给论文提供科学依据;

5、投标:检测周期短,准确性高,出具的第三方检测报告合法合规;

7、控制材料质量,进行产品内控,降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通,确定具体的试验方案,我方报价;

2、双方签订委托书,我方接收样品;

3、进行细节沟通,我方进行试验测试;

4、试验测试完成,出具检测测试报告;

5、委托完成,我方提供售后服务。

检测流程

检测仪器(部分)

实验仪器

实验仪器-手机

合作客户(部分)

合作客户

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