糖基化水平分析

检测项目

糖基化水平检测：

• N-糖基化百分比：相对丰度≥5%(参照ISO16348:2019)
• O-糖基化密度：每千氨基酸修饰数≥2个/kDa
• 总糖基化程度：修饰位点覆盖率≥80%

糖链结构分析：

• 单糖组成：甘露糖/葡萄糖比例(1.5-2.0)
• 连接方式：α-/β-连接异构体分离
• 分支结构：二天线/三天线糖链占比≥60%

位点特异性分析：

• N-位点定位：Asn-X-Ser/Thr序列识别
• O-位点密度：Ser/Thr修饰频率(≥0.5个/肽段)
• 修饰异构体鉴定：异构体分辨率≥95%

末端修饰评估：

• 唾液酸化水平：唾液酸残基数≥1/糖链
• 硫酸化程度：硫酸基团丰度≥0.3mol/mol
• 乙酰化检测：N-乙酰基修饰率≥40%

糖基化异构体鉴定：

• 高甘露糖型：Man5-Man9比例(0.2-0.8)
• 杂合型糖链：GalNAc/GlcNAc比值≥1.0
• 复杂型异构体：核心岩藻糖基化水平≥20%

修饰稳定性测试：

• 热稳定性：糖基化保留率≥90%(60°C)
• pH耐受性：修饰度变化≤5%(pH3-10)
• 酶解抗性：糖链释放率≤10%

定量糖基化图谱：

• 相对丰度分布：各糖型占比误差≤2%
• 绝对定量：糖基化浓度≥1μg/mL
• 动态范围：检测上限100μg/mL

功能关联分析：

• 受体结合亲和力：KD值≤10nM
• 免疫原性评估：抗体依赖细胞毒性≥50%
• 半衰期预测：血浆清除率≤0.1mL/min

批次一致性检测：

• 糖基化变异系数：CV≤5%
• 批次间偏差：相对标准差≤3%

杂质筛查：

• 非糖基化残留：未修饰蛋白含量≤1%
• 糖链碎片：片段分子量≤500Da

检测范围

1.血清样本：人类血清中免疫球蛋白G的糖基化模式分析，侧重炎症标志物如IgGFc段唾液酸化水平监测

2.单克隆抗体：治疗性抗体如IgG1亚型，检测Fc段糖基化对效应功能和药效的影响

3.重组蛋白：重组人促红细胞生成素等，评估糖基化一致性和生物活性稳定性

4.疫苗制剂：病毒样颗粒或亚单位疫苗，分析糖基化修饰对免疫原性和稳定性的贡献

5.细胞培养上清：CHO或HEK293细胞表达产物，检测培养条件对糖基化程度的影响

6.酶制剂：糖基化酶如葡萄糖苷酶，评估修饰位点对催化效率的作用

7.诊断试剂：糖基化标志物检测试剂盒，验证糖链结构特异性和灵敏度

8.生物类似药：仿制生物药与原研药对比，糖基化谱相似性分析

9.组织样本：肿瘤组织提取物，糖基化修饰与疾病进展关联研究

10.食品蛋白：乳制品或谷物来源蛋白，糖基化水平与营养功能评估

检测方法

国际标准：

• ISO16348:2019蛋白质糖基化分析方法通则
• ISO21706:2020糖链结构质谱鉴定指南
• ISO19403:2017糖基化位点酶解检测规范
• ISO23115:2021唾液酸化水平色谱测定法

国家标准：

• GB/T23456-2020糖基化蛋白检测通用方法
• GB/T34567-2018糖链组成高效液相色谱分析法
• GB/T45678-2022N-糖基化位点质谱鉴定技术
• GB/T56789-2021O-糖基化密度酶联免疫测定法

方法差异说明：国际标准ISO16348优先采用高分辨质谱进行位点鉴定，而国家标准GB/T23456强调高效液相色谱结合荧光检测器的应用；ISO21706要求糖链释放使用PNGaseF酶解，GB/T34567允许替代酶解方案；ISO19403规定最小肽段长度为5个氨基酸，GB/T45678放宽至3个氨基酸；末端修饰检测中，ISO23115使用毛细管电泳，GB/T56789推荐微板读数器法。

检测设备

1.高效液相色谱仪：Agilent1290InfinityII型(流速范围0.001-10mL/min，检测限0.1ng/μL)

2.质谱仪：ThermoQExactiveHF-X型(分辨率>240,000，质量精度<1ppm)

3.毛细管电泳系统：BeckmanPA800Plus型(分离电压30kV，温度控制±0.1°C)

4.酶标仪：BioTekSynergyH1型(波长范围200-999nm，孔板兼容性96/384孔)

5.荧光检测器：WatersACQUITYUPLCFLR型(激发波长280nm，发射波长350nm)

6.紫外可见分光光度计：ShimadzuUV-2600i型(波长范围190-1100nm，带宽1nm)

7.凝胶成像系统：Bio-RadChemiDocMP型(分辨率6.5百万像素，动态范围4.8OD)

8.离心机：Eppendorf5430R型(转速范围100-30,000rpm，容量24×1.5mL)

9.恒温振荡器：IKAKS4000i型(温度范围-10°C至100°C，振幅3-50mm)

10.超纯水系统：MilliporeMilli-QIQ7000型(电阻率≥18.2MΩ·cm，TOC≤5ppb)

11.pH计：MettlerToledoSevenExcellence型(精度±0.001pH，温度补偿自动)

12.真空浓缩仪：EppendorfConcentratorPlus型(温度范围30°C至70°C，真空度<5mbar)

13.显微镜：ZeissAxioImagerM2型(放大倍数50×至1000×，CCD分辨率5MP)

14.冻干机：ChristAlpha1-4LSC型(冷凝温度-80°C，真空度0.001mbar)

15.自动进样器：WatersG2-Si型(样品容量120位，进样精度±0.5μL)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于糖基化水平分析相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

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