ASTME1870-15微生物发酵破壁效果测试

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所在栏目:其他检测
发布时间:2025-07-28
信息来源:北检院
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检测项目

破壁率定量分析:

  • 细胞完整性计数:[破损细胞比率](显微镜视野统计法,≥200视野)
  • DNA/RNA释放量:[胞核酸浓度](μg/mL,参照GB/T34796)
  • 破壁效率指数:[破碎指数PI](0-1标度,ASTME1870-15公式计算)
胞内物质释放测定:
  • 蛋白质溶出率:[可溶性蛋白增量](mg/g干菌体,Lowry法)
  • 酶活性释放度:[胞内酶比活](U/mg,参照ISO18158)
  • 代谢产物回收率:[目标产物得率](%,HPLC定量)
细胞形态学表征:
  • 结构完整性评分:[形态破损等级](1-5级,SEM/TEM判定)
  • 碎片粒径分布:[D50值](μm,激光衍射法ISO13320)
  • 细胞壁残留量:[几丁质/肽聚糖含量](mg/g,比色法)
物理性能检测:
  • 悬浮液浊度:[OD600衰减率](%,分光光度法)
  • 粘度变化率:[流变特性偏差](mPa·s,旋转粘度计ASTMD2196)
  • Zeta电位:[表面电荷偏移](mV,动态光散射法)
生化指标分析:
  • ATP泄漏量:[胞外ATP浓度](nM,荧光素酶法)
  • 膜通透性变化:[PI染色阳性率](%,流式细胞术)
  • 自由基生成量:[ROS释放浓度](μmol/L,DCFH-DA探针法)
残留活性检测:
  • 存活细胞比例:[CFU计数衰减](log值,平板培养法)
  • 代谢活性残留:[脱氢酶活性](TF%还原率,INT法)
产物稳定性评估:
  • 目标产物降解率:[热敏物质保留量](%,HPLC-MS)
  • 聚合度变化:[分子量分布](kDa,SEC-MALLS)
工艺参数关联性:
  • 破壁能效比:[kJ/g破碎功](能量输入/破碎量)
  • 温度敏感性:[活性损失斜率](%/℃,Arrhenius模型)
安全限值检测:
  • 内毒素释放量:[EU/mg](鲎试剂法GB/T14233)
  • 致敏原残留:[β-葡聚糖含量](ppm,ELISA)
重复性验证:
  • 批间RSD值:[破壁率偏差](≤5%,n=10)
  • 方法回收率:[标准品加标回收](95-105%)

检测范围

1.酵母菌发酵产物:啤酒酵母/毕赤酵母等,重点检测β-葡聚糖壁层破碎均匀性及酶释放效率

2.革兰氏阳性细菌:枯草芽孢杆菌/乳酸杆菌等,侧重肽聚糖层破碎度与胞内蛋白溶出率测定

3.革兰氏阴性细菌:大肠杆菌/假单胞菌等,关注外膜脂多糖释放控制及内膜穿透效果验证

4.丝状真菌:黑曲霉/米曲霉等,检测菌丝体断裂模式及胞内次级代谢产物释放动力学

5.放线菌发酵液:链霉菌属等,评估抗剪切力特性及抗生素释放选择性

6.微藻生物质:小球藻/螺旋藻等,测定纤维素壁破除效率及色素稳定性

7.基因工程菌株:重组蛋白表达菌,验证目标蛋白释放率与宿主DNA残留量关联性

8.古菌发酵产物:嗜热菌/产甲烷菌等,检测特殊细胞壁结构(假肽聚糖)破碎阈值

9.疫苗生产用细胞:分枝杆菌等,评估抗原释放完整性及内毒素控制水平

10.固定化细胞载体:海藻酸钙包埋体系,检测载体破裂率与细胞逃逸量的平衡点

检测方法

国际标准:

  • ASTME1870-15微生物细胞破壁效果标准测试方法
  • ISO13320:2020粒度分析-激光衍射法
  • ISO21527-2:2008酵母菌和霉菌计数
  • EP2.6.14细菌内毒素测试
国家标准:
  • GB/T34796-2017核酸浓度测定通则
  • GB/T14643.5-2009微生物浊度测定法
  • GB/T16293-2010医药工业洁净室悬浮粒子测试
  • GB/T27405-2008实验室质量控制规范分子生物学检测
方法差异说明:ASTME1870采用双染色法(PI/FDA)评估膜完整性,GB/T14643.5侧重浊度衰减率;ISO13320要求分散剂浓度≤0.05%,而ASTMD2196允许最高0.1%表面活性剂添加

检测设备

1.高压均质破碎机:GEANiroSoaviNS1000H型(操作压力50-150MPa,温控±1℃)

2.激光粒度分析仪:MalvernMastersizer3000型(量程0.01-3500μm,精度±1%)

3.扫描电子显微镜:HitachiRegulus8230型(分辨率1.0nm,低真空模式)

4.流式细胞仪:BDFACSAriaIII型(488/640nm双激光,检测限50nm)

5.全自动酶标仪:ThermoMultiskanSkyHigh型(波长范围200-1000nm,CV≤0.5%)

6.高效液相色谱:Agilent1290InfinityII型(DAD检测器,波长精度±1nm)

7.旋转流变仪:AntonPaarMCR302型(扭矩范围0.05-200mNm,温控±0.1℃)

8.超声波破碎仪:SonicsVCX800型(频率20kHz,功率密度0-1000W/cm²)

9.全自动细胞计数器:Bio-RadTC20型(计数速度<30秒/样,精度±5%)

10.冷冻超薄切片机:LeicaUC7型(切片厚度10-500nm,温控-160℃)

11.微量热仪:TAInstrumentsNanoDSC型(灵敏度0.1μW,温变速率0.1-10℃/min)

12.激光共聚焦显微镜:ZeissLSM980型(Airyscan2技术,分辨率120nm)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是关于ASTME1870-15微生物发酵破壁效果测试相关介绍,如果您还有其他疑问,可以咨询在线工程师提交您的需求,为您提供一对一解答。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系,科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广,可参考标准多(国标、企标、通标、工标、国际标准等)。

5、周期短,费用低,方案全。

6、支持定制化试验方案,数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全,团队强,后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断:包括失效分析、科学诊断、数据验证等,可以快速检测出产品问题,尽快止损;

2、其他鉴定服务:协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析;

4、研发使用:试验经验丰富,试验设备多,为科研工作提供数据支持;

3、高校论文:提供研究性实验数据、分析服务,给论文提供科学依据;

5、投标:检测周期短,准确性高,出具的第三方检测报告合法合规;

7、控制材料质量,进行产品内控,降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通,确定具体的试验方案,我方报价;

2、双方签订委托书,我方接收样品;

3、进行细节沟通,我方进行试验测试;

4、试验测试完成,出具检测测试报告;

5、委托完成,我方提供售后服务。

检测流程

检测仪器(部分)

实验仪器

实验仪器-手机

合作客户(部分)

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