血清药品特异性抗体检测

检测项目

抗体类型鉴定：

• IgG类型：定性检测(参照ELISA法)、亚型分布(IgG1/IgG2/IgG3/IgG4)
• IgM类型：阳性判定阈值(OD值≥2.1×阴性对照)、交叉反应排除(与IgG的区分度≥90%)
• IgA类型：样本稀释倍数(1:50)、检测下限(0.1μg/mL)

抗体滴度测定：

• 终点稀释法：滴度值(≥1:100为阳性)、重复性偏差(±1个稀释度)
• 荧光免疫法：相对荧光强度(RFU≥500)、线性范围(1:10-1:10000)
• 化学发光法：信号值(S/CO≥2.0)、最低检测限(0.05IU/mL)

亲和力评估：

• 解离常数(KD)：≤1×10⁻⁹M(参照Biacore法)、温度依赖性(25℃±1℃)
• 结合常数(Ka)：≥1×10⁶M⁻¹s⁻¹、动力学曲线拟合度(R²≥0.95)
• 亲和力指数(AI)：≥1.0(指示高亲和力)、浓度依赖性(0.1-10μg/mL)

交叉反应分析：

• 同源蛋白交叉：反应率(≤5%)、信号差异(≥3倍阈值)
• 异源药物交叉：结合率(≤10%)、竞争抑制率(≥90%)
• 内源性抗体交叉：排除率(≥95%)、验证方法(免疫沉淀法)

中和活性检测：

• 细胞增殖抑制：IC50值(≤1μg/mL)、细胞活力(≥80%)
• 细胞因子抑制：TNF-α抑制率(≥50%)、IL-6降低幅度(≥40pg/mL)
• 病毒中和：中和效价(≥1:20)、plaquereductionassay(PRNT50)

同种异型抗体检测：

• IgG同种异型：G1m(3)、G1m(17)分型(参照PCR-SSP法)
• IgA同种异型：A2m(1)、A2m(2)频率(±5%人群分布)
• IgM同种异型：M1、M2亚型(测序法验证)

Fc段功能分析：

• 补体依赖细胞毒性(CDC)：细胞裂解率(≥30%)、补体浓度(10%人血清)
• 抗体依赖细胞介导细胞毒性(ADCC)：效应细胞比例(10:1)、靶细胞死亡率(≥25%)
• Fcγ受体结合：FcγRIIIa亲和力(KD≤5×10⁻⁸M)、FcγRIIb抑制率(≥20%)

抗体亚类分型：

• IgG1：比例(≥60%)、分泌细胞频率(CD19⁺CD27⁺IgG1⁺%)
• IgG2：表达水平(≤20%)、糖基化修饰(岩藻糖含量±0.5%)
• IgG4：转换率(≥10%)、稳定性(37℃放置7天活性保留≥80%)

药物结合位点分析：

• 表位mapping：重叠肽段结合率(≥70%)、竞争实验验证(≥90%抑制)
• 构象表位：变性条件(8M尿素)、结合丧失率(≥95%)
• 线性表位：肽段长度(15-20aa)、序列覆盖率(≥80%)

稳定性评估：

• 热稳定性：Tm值(≥60℃)、聚集率(≤5%)
• 冻融稳定性：活性保留(≥90%，3次冻融)、沉淀量(≤0.1mg/mL)
• 长期稳定性：4℃放置6个月活性(≥85%)、-20℃放置12个月降解率(≤10%)

免疫复合物检测：

• 复合物浓度：≥10μg/mL(透射比浊法)、颗粒大小(10-100nm)
• 药物-抗体比例：1:1结合(molarratio)、解离率(≤5%/h)
• 补体结合：C3c含量(≥1μg/mL)、C1q结合率(≥15%)

检测范围

1.治疗性单抗药物：涵盖利妥昔单抗、曲妥珠单抗、帕博利珠单抗等靶点药物，重点检测抗药抗体(ADA)的存在及效价，评估免疫原性对疗效的影响

2.重组蛋白药物：包括胰岛素、生长激素、促红细胞生成素(EPO)等，侧重检测中和性抗体对药物生物学活性的抑制作用

3.疫苗佐剂复合物：涵盖铝佐剂疫苗、油乳剂疫苗，重点检测佐剂诱导的特异性抗体类型及亲和力

4.生物类似药：包括贝伐珠单抗生物类似药、阿达木单抗生物类似药，侧重与原研药的抗体交叉反应及中和活性差异

5.细胞治疗产品：涵盖CAR-T细胞、干细胞产品，重点检测针对载体蛋白(如CD19scFv)的抗体

6.基因治疗载体：包括腺病毒载体、慢病毒载体，重点检测针对载体外壳蛋白的中和抗体

7.血液制品：涵盖人免疫球蛋白、凝血因子Ⅷ，重点检测同种异型抗体及自身抗体

8.抗体偶联药物(ADC)：包括曲妥珠单抗-DM1、维布妥昔单抗，重点检测针对抗体部分的ADA及对细胞毒性载荷的影响

9.融合蛋白药物：包括依那西普(TNFR-Fc)、阿巴西普(CTLA4-Fc)，重点检测针对Fc段的抗体及功能抑制

10.多肽类药物：包括格拉替雷、利拉鲁肽，重点检测针对多肽序列的高亲和力抗体

检测方法

国际标准：

• ISO17123-1:2020生物制品中抗药抗体检测第1部分：通用要求(规定了样本前处理及对照设置)
• ASTME1383-19荧光免疫分析标准实践(强调荧光素标记效率及背景信号控制)
• ISO20186-1:2019流式细胞术第1部分：总则(指导细胞表面抗体结合检测的仪器校准)
• ICHQ6B:2005生物制品的检测方法验证(规定了抗体检测的特异性、灵敏度验证要求)

国家标准：

• GB/T38572-2020生物制品中抗药抗体检测通则(明确了ELISA法的临界值计算方法，采用2.1倍阴性对照均值)
• GB/T21415-2020动物源性材料中抗体检测方法(规定了样本预处理的温度条件为2-8℃)
• GB/T35918-2018流式细胞术检测抗体结合能力指南(强调仪器的荧光补偿设置，要求补偿率≥95%)
• GB/T39789-2021生物类似药相似性评价指南(指导抗药抗体交叉反应的比较研究)

国际标准与国家标准的方法差异主要体现在临界值计算(ISO17123-1采用3倍阴性对照均值，GB/T38572采用2.1倍)、样本稀释倍数(ASTME1383推荐1:100，GB/T21415推荐1:50)及荧光补偿要求(ISO20186-1要求补偿率≥90%，GB/T35918要求≥95%)

检测设备

1.酶标仪：ThermoScientificMultiskanFC(波长范围400-750nm，检测精度±1%，板型兼容96/384孔，支持双波长检测)

2.流式细胞仪：BDFACSCantoII(激光波长488nm、633nm，检测通道10色，最小颗粒检测尺寸0.2μm，流速1000cells/sec)

3.表面等离子体共振仪(SPR)：BiacoreT200(灵敏度0.01RU，流速范围1-100μL/min，温度控制25℃±0.1℃，支持多通道并行检测)

4.荧光显微镜：LeicaDMi8(荧光激发块DAPI/GFP/RFP/Cy5，分辨率1920×1080，放大倍数10×-63×，支持活细胞成像)

5.高速离心机：Eppendorf5810R(最大转速15000rpm，容量4×50mL，离心力21952×g，温度控制4℃±1℃)

6.生物安全柜：ESCOAirstream®A2(过滤效率99.995%@0.3μm，风速0.5m/s±0.05，工作区尺寸1500×750×600mm，支持三级生物安全防护)

7.超低温冰箱：ThermoFisherUltra-Low-86℃(容量519L，温度波动±1℃，制冷剂R404A，能耗≤1.2kW/h)

8.实时定量PCR仪：AppliedBiosystemsQuantStudio5(荧光通道6色，检测限10copies/μL，反应体积10-100μL，支持多重PCR)

9.蛋白层析系统：ÄKTApure25(流速范围0.1-25mL/min，压力上限10MPa，检测波长280nm/260nm，支持自动馏分收集)

10.全自动免疫分析仪：RocheCobase602(检测速度170tests/h，试剂位48个，样本位150个，支持电化学发光与比浊法)

11.质谱仪：BrukermaXisII(分辨率150000FWHM，质量范围50-10000m/z，灵敏度100amol，支持ESI/APCI离子源)

12.电泳仪：Bio-RadPowerPacHC(输出电压20-300V，电流0.1-2.5A，功率500W，支持垂直/水平电泳)

13.化学发光分析仪：SiemensADVIACentaurXP(检测项目≥150项，throughput200tests/h，最低检测限0.01pg/mL，支持磁性微粒子分离)

14.免疫沉淀仪：BeckmanCoulterBiomek4000(移液精度±1%，处理容量1-1000μL，支持96孔板自动化操作，整合超声破碎功能)

15.细胞培养箱：ThermoFisherForma3111(CO₂浓度控制5%±0.1%，温度37℃±0.1℃，湿度≥95%，容量180L，支持HEPA过滤)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于血清药品特异性抗体检测相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

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