HHV-6 DNA定量分析

检测项目

病毒载量检测：

• 绝对定量：检测限≥10copies/μL，线性范围10^1-10^8copies/mL(参照ISO15189)
• 相对定量：Ct值差异≤0.5cycles，扩增效率90%-110%
• 动态范围：R²≥0.99

DNA提取效率：

• 回收率：≥95%(OD260/280比值1.8-2.0)
• 纯度检测：抑制剂残留≤5%
• 完整性评估：DNA片段大小≥200bp

特异性验证：

• HHV-6A/B区分：交叉反应率≤1%(参照CLSIMM19-A)
• 非靶标干扰：阴性对照无扩增
• 序列比对：同源性≥99%

灵敏度分析：

• 检测下限：LOD≥10copies/μL
• 定量下限：LOQ≥50copies/μL
• 检出率：≥95%

重复性评估：

• 批内变异：CV≤5%
• 批间变异：CV≤10%
• 重现性：标准差≤0.2cycles

准确性验证：

• 偏差控制：±10%以内
• 回收试验：85%-115%
• 标准品校准：NISTSRM2972参照

线性度测试：

• 稀释线性：斜率0.9-1.1
• 范围验证：10-fold梯度覆盖
• 拟合优度：R²≥0.98

交叉反应测试：

• 相关病毒排除：EJianCe/CMV干扰≤0.1%
• 宿主DNA干扰：抑制率≤2%
• 多病原体筛查：特异性≥99%

稳定性试验：

• 冻融稳定性：≤3cycles降解≤10%
• 长期储存：-80°C下≥12个月稳定性
• 试剂有效期：室温≤24h变化≤5%

质量评估：

• 内标控制：内参基因Ct值18-22
• 阴性/阳性对照：符合率100%
• 质控品使用：CRM标准参照

检测范围

1.全血样本：EDTA抗凝血，重点检测HHV-6急性感染期病毒载量动态变化

2.血清样本：无添加剂血清，侧重潜伏感染监测和载量基线确定

3.血浆样本：肝素抗凝血浆，检测重点为治疗响应评估和病毒清除率

4.脑脊液样本：无菌采集CSF，核心检测脑炎相关HHV-6DNA载量阈值

5.组织样本：福尔马林固定石蜡包埋组织，侧重组织特异性病毒分布定量

6.唾液样本：口腔拭子采集，检测非侵入性筛查和流行病学研究

7.骨髓样本：骨髓穿刺液，重点监测移植后HHV-6再激活风险

8.尿样样本：晨尿收集，检测儿童原发感染病毒排泄水平

9.细胞培养物：体外培养细胞提取物，侧重病毒复制动力学研究

10.冻存样本：-80°C保存生物样本，检测长期稳定性对定量结果影响

检测方法

国际标准：

• ISO15189:2022医学实验室质量和能力要求(涵盖qPCR验证流程)
• CLSIMM19-A核酸扩增检测性能验证指南(规定特异性测试参数)
• ISO20395:2019生物技术核酸定量方法(要求线性度和LOD/LOQ测定)

国家标准：

• GB/T37871-2019病毒核酸检测通用要求(指定Ct值阈值和重复性标准)
• GB/T34796-2017核酸提取纯化试剂盒(规范DNA回收率和纯度参数)
• GB/T40982-2021荧光定量PCR检测方法(差异：GB标准强调室温稳定性测试，而ISO更注重冷冻样本处理)

检测设备

1.实时荧光定量PCR仪：AppliedBiosystems7500Fast(检测通道6个，温度精度±0.1°C)

2.DNA提取仪：QIAGENQIAcube(通量24样本/批次，回收率≥95%)

3.分光光度计：ThermoScientificNanoDropOne(波长范围190-850nm，分辨率0.001OD)

4.高速离心机：Eppendorf5425R(最高转速15000rpm，温度控制4-40°C)

5.生物安全柜：EscoAirstream(洁净度Class100，风速0.4m/s)

6.超低温冰箱：ThermoScientificForma900(温度范围-86°C，稳定性±1°C)

7.微量移液器：EppendorfResearchPlus(量程0.1-1000μL，精度±0.5%)

8.恒温水浴锅：MemmertWB22(控温精度±0.1°C，范围室温-100°C)

9.凝胶成像系统：Bio-RadGelDocXR+(分辨率500万像素，荧光检测灵敏度0.1ng)

10.真空浓缩仪：EppendorfConcentratorPlus(真空度<5mbar，温度范围30-60°C)

11.振荡器：IKAMS3digital(转速50-1500rpm，振幅3mm)

12.电子天平：MettlerToledoXS205(称量范围0-220g，精度0.01mg)

13.pH计：HannaInstrumentsHI98100(测量范围0-14.00，精度±0.01)

14.热循环仪：Bio-RadT100(温度梯度±0.1°C，升降温速率4°C/s)

15.冰箱：HaierDW-40L388(温度范围-40°C，容积380L)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于HHV-6 DNA定量分析相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

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