心脏灌流心肌细胞葡萄糖摄取检测

检测项目

葡萄糖摄取动力学检测：

• 摄取速率测定：最大摄取速率(Vmax，范围0.1-5.0μmol/g/min)、米氏常数(Km，参照ISO23456标准)
• 亲和力评估：半最大效应浓度(EC50，精度±0.01μM)、希尔系数(nH≥1.0)

细胞代谢状态分析：

• ATP含量检测：ATP浓度(nmol/mg蛋白，检测限0.1nmol/mL)
• 乳酸产量测定：乳酸释放率(mmol/L/h，范围0.05-2.0)
• 糖原储备量：糖原含量(μg/mg组织，参照GB/T5009.8标准)

胰岛素响应检测：

• 胰岛素敏感性指数：IS值(变化率≥50%为阳性)
• GLUT4转位率：膜蛋白表达量(倍数变化1.5-3.0)

细胞活力评估：

• 存活率检测：细胞存活率(%，标准≥90)
• 凋亡指数：Caspase-3活性(RFU/mg蛋白)

缺氧应激模型检测：

• 缺氧耐受时间：维持摄取值时间(min，精度±1min)
• 再灌流恢复率：摄取恢复百分比(≥80%为正常)

药物干预分析：

• 抑制剂效能：IC50值(μM，参照FDA指南)
• 激动剂响应：摄取增加率(%，偏差≤3)

膜转运蛋白检测：

• GLUT1表达量：相对表达倍数(1.0-2.5)
• GLUT4膜定位：荧光强度比(膜/胞浆≥2.0)

能量代谢平衡：

• 氧耗速率：OCR(pmol/min，精度±5%)
• 酸化率：ECAR(mpH/min)

氧化应激参数：

• ROS水平：相对荧光单位(RFU，范围100-500)
• SOD酶活性：抑制率(%)

病理模型验证：

• 糖尿病心肌病模型：摄取抑制率(%，标准≤60)
• 缺血再灌注损伤：恢复延迟时间(s)

检测范围

1.啮齿类动物离体心脏灌流模型：成年大鼠或小鼠心脏，重点检测基础葡萄糖摄取及胰岛素刺激响应，确保灌流压力稳定在80-120mmHg

2.人心肌细胞原代培养物：手术获取组织，侧重长期培养后代谢稳定性，检测重点为GLUT4表达变异

3.诱导多能干细胞来源心肌细胞：iPS分化心肌细胞，关注发育阶段摄取效率变化，检测重点为成熟度标记物表达

4.心肌组织切片灌流系统：薄切片(厚度≤200μm)，重点检测区域异质性及边缘效应

5.转基因动物模型心肌：GLUT4敲除或过表达模型，侧重基因型对摄取动力学影响

6.病理状态心肌样本：糖尿病或心肌缺血患者组织，检测重点为缺氧诱导摄取抑制

7.三维心肌细胞球体：类器官培养，关注空间梯度下摄取分布

8.新生儿心肌细胞培养：出生后组织，侧重发育相关代谢转换

9.药物筛选平台心肌细胞：高通量培养板，检测重点为化合物干预效能

10.冷冻保存心肌细胞：液氮冻存样本，关注解冻后摄取功能恢复率

检测方法

国际标准：

• ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-第5部分：体外细胞毒性试验
• ISO23456:2018细胞葡萄糖摄取测定-放射性标记法
• FDAGuidanceforIndustry:DiabetesMellitus(2020)-葡萄糖转运评估
• OECDTG432:2019体外细胞代谢试验指南

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价-第5部分：体外细胞毒性试验
• YY/T0127.1-2014医用生物学评价-细胞培养方法
• GB/T5009.8-2016食品中糖的测定-葡萄糖分光光度法
• YY/T1556-2017心肌细胞培养技术规范

(国际标准侧重全局安全评估，国标强化具体参数如细胞存活率阈值；例如ISO允许宽泛缓冲液选择，GB指定PBS缓冲体系；FDA指南涵盖药物响应测试，YY标准细化灌流流速控制)

检测设备

1.液体闪烁计数器：PerkinElmerTri-Carb4910TR(检测限0.01DPM，计数效率≥65%)

2.荧光显微镜：NikonEclipseTi2(分辨率0.2μm，放大倍数40x-1000x)

3.微板读数仪：TecanInfiniteM200Pro(波长范围230-1000nm，精度±1nm)

4.灌流系统控制器：RadnotiLangendorff120402(流量范围1-20mL/min，压力控制±2mmHg)

5.细胞代谢分析仪：AgilentSeahorseXFe96(OCR检测限0.5pmol/min)

6.离心机：Eppendorf5430R(转速100-15000rpm，温控±0.5°C)

7.实时PCR仪：Bio-RadCFX96(检测通道6色，温控精度±0.1°C)

8.流式细胞仪：BDFACSCantoII(检测速率10000细胞/秒，激光波长488nm)

9.血糖分析仪：YSI2900(葡萄糖检测范围0-600mg/dL，精度±0.05mmol/L)

10.恒温培养箱：ThermoScientificHeracell150i(温度范围5-50°C，CO2控制±0.1%)

11.组织切片机：LeicaVT1200S(切片厚度5-1000μm，振动频率50-90Hz)

12.荧光分光光度计：HitachiF-7000(激发波长200-750nm，信噪比≥150)

13.细胞培养生物反应器：SartoriusBiostatQplus(搅拌速度10-300rpm，DO控制±2%)

14.低温离心浓缩仪：LabconcoCentriVap(温度-50°C，真空度≤10mTorr)

15.电化学检测系统：Metrohm794Basic(葡萄糖传感器灵敏度0.001μM)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于心脏灌流心肌细胞葡萄糖摄取检测相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

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报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

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4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

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试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

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