RNA-protein结合试验

检测项目

结合亲和力检测：

• 解离常数测定：Kd值(范围0.1nM-100μM，参照ISO15197:2013)
• 结合常数计算：Ka值(≥1×10^6M⁻¹)
• 饱和结合分析：Bmax值(单位fmol/mg)

动力学参数分析：

• 结合速率测量：kon值(单位M⁻¹s⁻¹)
• 解离速率评估：koff值(单位s⁻¹)
• 平衡时间确定：t1/2(≥0.5s)

特异性验证：

• 交叉反应性测试：非靶蛋白抑制率(≤5%)
• 序列特异性分析：错配碱基容忍度(≤2nt)
• 同源物干扰评估：同源性≤80%时的结合干扰

热力学研究：

• 焓变测定：ΔH值(单位kJ/mol)
• 熵变计算：ΔS值(单位J/mol·K)
• 自由能变化：ΔG值(≤-30kJ/mol)

结构表征：

• 结合位点映射：分辨率≤2Å
• 构象变化监测：RMSD值(≤0.5nm)
• 二级结构分析：α-螺旋含量变化(±10%)

功能活性assay：

• 酶活性抑制：IC50值(单位nM)
• 转录调控效率：荧光素酶报告基因活性(foldchange≥2)
• 细胞定位验证：核质比例(≥1.5)

高通量筛选：

• 芯片-based结合：点阵密度≥1000spots/cm²
• 荧光偏振检测：Z'因子(≥0.5)
• 自动化吞吐量：≥1000samples/day

体内结合试验：

• 细胞结合效率：摄取率(≥70%)
• 动物模型验证：肿瘤抑制率(≥50%)
• 生物分布分析：组织浓度(单位ng/g)

质量控制参数：

• RNA纯度检测：A260/A280比值(1.8-2.0)
• 蛋白稳定性：降解率(≤5%/24h)
• 结合重现性：CV值(≤15%)

生物信息学预测：

• 序列比对一致性：E-value(≤1e-5)
• 结构模拟精度：TM-score(≥0.5)
• 结合能计算：dG值(单位kcal/mol)

检测范围

1.mRNA与核糖体蛋白结合：重点检测翻译起始复合物形成效率、Kozak序列依赖性结合强度

2.siRNA与Argonaute蛋白结合：侧重RISC负载效率、guidestrand选择特异性、off-target效应评估

3.lncRNA与染色质修饰蛋白：检测组蛋白甲基化调控、nuclearspeckle定位、基因沉默效率

4.病毒RNA与宿主蛋白结合：关注复制复合体组装、immuneevasion机制、聚合酶相互作用

5.适配体与靶蛋白结合：重点验证高亲和力(Kd≤nM)、构象切换、诊断应用可行性

6.核糖核酸酶与底物RNA：检测酶切速率、特异性位点识别、抑制剂筛选

7.转录因子与DNA结合域：侧重顺式元件亲和力、二聚化影响、磷酸化调控

8.剪接因子与pre-mRNA结合：关注分支点识别、exonskipping效率、突变体功能丧失

9.端粒酶RNA与蛋白组分：检测端粒延长活性、processivity、癌症相关突变影响

10.微小RNA与RISC复合物：重点评估靶mRNA抑制、种子序列匹配、组织特异性表达

检测方法

国际标准：

• ISO15197:2013体外诊断系统-核酸蛋白结合试验要求
• ISO10993-5:2009生物相容性测试-分子相互作用评估
• IEEE1278:2015生物分子相互作用测量标准(动力学参数)

国家标准：

• GB/T37872-2019RNA蛋白结合试验通用要求
• GB/T34796-2017核酸结合蛋白活性测定方法
• GB/T34224-2017生物芯片技术规范(高通量筛选)

方法差异说明：国际标准ISO15197强调临床验证和精度控制，而国家标准GB/T37872更注重科研应用和参数范围；ISO10993-5包含生物安全性评估，GB/T34796聚焦体外活性测定；IEEE标准适用于高端仪器参数，而GB/T34224针对芯片技术有详细操作流程。

检测设备

1.表面等离子共振仪：BiacoreT200型(检测限0.1RU，流速范围1-100μL/min)

2.等温滴定calorimeter：MicroCalPEAQ-ITC型(温度范围2-80°C，灵敏度0.1μcal/s)

3.荧光偏振仪：SpectraMaxiD5型(波长范围250-850nm，精度±2mP)

4.凝胶电泳系统：Bio-RadChemiDocMP型(分辨率3MP，曝光时间0.1-60s)

5.实时PCR仪：AppliedBiosystems7500Fast型(升温速率5°C/s，通道数5)

6.质谱仪：ThermoFisherOrbitrapFusion型(分辨率240000，质量精度<1ppm)

7.核磁共振仪：BrukerAvanceNEO600MHz型(场强14.1T，探头类型cryoPROBE)

8.X射线晶体学设备：RigakuSynergy-S型(波长1.5418Å，探测器面积300mm²)

9.原子力显微镜：BrukerDimensionIcon型(分辨率原子级，扫描范围90μm)

10.流式细胞仪：BDFACSymphonyA5型(参数数50，速度100000events/s)

11.微阵列扫描仪：AgilentSureScanDx型(分辨率2μm，扫描速度slides/hour)

12.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN-100型(最大转速100000rpm，温度控制±0.1°C)

13.圆二色谱仪：JascoJ-1500型(波长范围160-250nm，数据采集速率10Hz)

14.生物传感器平台：SartoriusOctetRED96e型(检测时间实时，通量96samples/run)

15.高通量筛选系统：PerkinElmerEnVision型(读板速度1s/well，兼容platetypes)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于RNA-protein结合试验相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、JianCe、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

上一篇：造纸用双氧水白度检测
下一篇：加速老化稳定性测试

本文地址：https://www.beijianceshi.com/bjcs-info/31506.html