1. RNA提取与纯化:从生物样本中分离mRNA,去除蛋白质、DNA和其他杂质,保证RNA完整性和高纯度,常用方法包括酚氯仿提取和柱层析纯化。
2. RNA纯度测定:使用分光光度计检测A260/A280和A260/A230吸光度比值,评估样本中污染物如蛋白质或有机溶剂的残留水平。
3. RNA浓度测定:通过紫外吸收法或荧光染料法精确测量RNA浓度,单位为纳克每微升,确保样本量符合后续分析要求。
4. RNA完整性评估:利用琼脂糖凝胶电泳或生物分析仪检测核糖体RNA条带,评估降解程度,常用完整性评分系统如RNA完整性数值。
5. 反转录效率测试:将mRNA反转录为互补DNA,评估反转录酶活性和反应条件一致性,确保定量分析的准确性和线性范围。
6. 实时荧光定量PCR:采用SYBR Green或TaqMan探针法,通过循环阈值定量mRNA表达水平,具有高灵敏度和特异性,适用于低丰度目标检测。
7. 数字PCR定量:基于微滴或芯片分区技术,实现单个分子扩增,绝对计数mRNA拷贝数,无需标准曲线,适用于稀有变异和精确计量。
8. 高通量测序分析:使用RNA测序技术全面检测mRNA表达谱,提供全转录组数据,用于差异表达基因分析和可变剪接研究。
9. 微阵列杂交定量:通过荧光标记的互补DNA与固定探针杂交,半定量检测多个基因表达水平,适用于大规模筛查和比较分析。
10. Northern印迹分析:传统方法通过电泳分离RNA并转移到膜上,使用标记探针检测特定mRNA,验证表达结果和转录本大小。
11. RNA稳定性测试:评估mRNA在特定条件下的降解速率,用于药物开发或环境因素影响研究,包括半衰期测定和降解动力学分析。
12. poly(A)尾长度测定:检测mRNA的poly(A)尾长度,影响翻译效率和稳定性,常用测序或酶法分析,提供转录后调控信息。
13. 内参基因验证:选择稳定的内参基因如GAPDH或ACTB,用于实时荧光定量PCR数据标准化,减少样本间变异和实验误差。
14. 表达水平标准化:使用统计方法如ΔΔCt法或RPKM值,将原始数据转换为相对或绝对表达量,确保结果可比性和统计显著性。
15. 质量控制参数:包括检测限、定量限、精密度和准确度评估,确保测试方法的可靠性和符合规范要求。
1. 细胞培养样本:源自哺乳动物细胞、昆虫细胞或细菌培养物;用于基因表达研究、药物筛选、细胞功能分析等。
2. 组织切片样本:包括肿瘤组织、正常组织、冷冻或石蜡包埋样本;应用于病理诊断、生物标志物发现、疾病机制研究。
3. 血液样本:全血、血浆或血清中的循环RNA;用于无创诊断、传染病检测、癌症早期筛查和预后评估。
4. 体液样本:如尿液、唾液、脑脊液等;探索非侵入性生物标志物,监测疾病状态和治疗反应。
5. 植物组织样本:叶片、根、种子等;研究植物基因表达、胁迫响应、发育生物学和作物改良。
6. 细菌样本:原核生物mRNA;用于微生物代谢工程、病原体检测、环境微生物研究和抗生素耐药性分析。
7. 病毒RNA样本:从病毒颗粒中提取的mRNA;应用于疫苗开发、病毒载量测定、抗病毒药物评估和流行病学监测。
8. 临床诊断样本:患者来源的活检组织或液体活检;辅助疾病诊断、预后评估、治疗监测和个性化医疗。
9. 科研实验样本:实验室制备的合成RNA或模型生物样本;用于方法验证、基础研究、技术开发和标准制定。
10. 生物制品样本:如mRNA疫苗、基因治疗产品;质量控制、效力测试、稳定性研究和批次放行检测。
11. 环境样本:土壤、水体中的微生物RNA;用于环境监测、生态研究、生物修复评估和污染物毒性分析。
12. 法医样本:犯罪现场提取的生物材料;用于个体识别、亲缘关系分析、证据鉴定和刑侦技术应用。
13. 食品和饲料样本:如转基因作物或微生物污染检测;确保食品安全、标签合规和风险评估。
14. 药物研发样本:包括候选药物处理后的细胞或组织;用于药效评估、毒性测试、作用机制研究和临床试验支持。
15. 教学演示样本:教育机构使用的标准RNA样本;用于学生实验、技能培训、方法演示和科学普及。
国际标准:
ISO 20395:2019、ISO 17025:2017、ISO 15189:2012、ISO 10993-1:2018、ISO 13485:2016、IEC 61010-1:2010、ISO 9001:2015、ISO 14001:2015、ISO 45001:2018、ISO 22000:2018、ISO 27001:2013、ISO 18113-1:2017、ISO 18115-1:2018
国家标准:
GB/T 37871-2019、GB/T 34796-2017、GB/T 30989-2014、GB/T 37872-2019、GB/T 37873-2019、GB/T 37874-2019、GB/T 37875-2019、GB/T 37876-2019、GB/T 37877-2019、GB/T 37878-2019、GB/T 37879-2019、GB/T 37880-2019
1. 分光光度计:用于测量RNA样本在260纳米和280纳米波长的吸光度,计算纯度和浓度,评估污染物水平,确保样本质量。
2. 荧光分光光度计:通过荧光染料如RiboGreen定量低浓度RNA,提高检测灵敏度和准确性,适用于痕量分析。
3. 实时荧光定量PCR仪:进行定量聚合酶链反应,监测荧光信号增长,精确测定mRNA表达水平,支持绝对和相对定量方法。
4. 数字PCR系统:基于微滴生成或芯片分区,实现单个分子扩增,绝对计数mRNA拷贝数,适用于稀有变异检测和低丰度样本。
5. 高通量测序仪:执行RNA测序,生成大量序列数据,用于全转录组分析、差异表达和可变剪接研究,提供高通量数据输出。
6. 微阵列扫描仪:读取微阵列芯片上的荧光信号,半定量检测多个基因表达,用于大规模筛查和比较分析。
7. 电泳系统:包括琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳,分离RNA分子,评估完整性和大小分布,辅助质量评估。
8. 生物分析仪:自动化平台,用于RNA完整性评分和浓度测定,提供高质量数据,减少人为误差和操作变异。
9. 核酸提取仪:自动化设备,从多种样本类型中纯化RNA,提高提取效率和一致性,适用于大规模处理和高通量应用。
10. 离心机:用于样本预处理、RNA沉淀和纯化步骤,确保分离效果和样本回收率,支持多种离心条件。
11. 恒温金属浴:提供精确温度控制,用于反转录、聚合酶链反应预混等反应,保证实验条件稳定和可重复性。
12. 超低温冰箱:存储RNA样本,保持在-80摄氏度或以下,防止降解,确保长期稳定性和样本完整性。
13. 荧光显微镜:用于观察RNA定位和表达模式,结合荧光标记技术,提供空间分布信息。
14. 酶标仪:用于高通量荧光或吸光度检测,评估多个样本的RNA浓度和纯度,适用于批量分析和快速筛查。
15. 生物安全柜:提供无菌操作环境,防止样本污染和人员暴露,确保实验安全和数据可靠性。
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
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