核酸提取回收率分析

检测项目

1.核酸浓度测定：采用分光光度法或荧光法量化提取核酸的绝对含量，为回收率计算提供基础数据。

2.纯度评估分析：通过吸光度比值检测蛋白质、盐类等污染物残留，确保样本适用于下游分子实验。

3.回收率定量计算：对比提取前后核酸质量或拷贝数，以百分比形式表征方法效率与损失程度。

4.完整性验证：利用凝胶电泳或生物分析仪检测核酸链断裂情况，评估提取过程对分子结构的影响。

5.抑制剂检测：识别样本中血红蛋白、肝素等常见抑制剂残留，分析其对扩增效率的干扰效应。

6.重复性测试：通过多次平行提取实验计算变异系数，验证方法稳定性和操作一致性。

7.酶切适用性检验：评估提取核酸对限制性内切酶等工具的敏感性，确认功能完整性。

8.储存稳定性监测：考察不同温度与时長条件下核酸降解速率，确定最佳保存方案。

9.基质效应研究：分析不同样本类型中复杂成分对提取效率的干扰，优化protocol适应性。

10.交叉污染评估：通过空白对照与阳性对照实验，检测提取过程中外源核酸引入风险。

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检测范围

1.全血样本核酸提取：涉及抗凝剂处理与细胞裂解步骤，需重点关注血红蛋白抑制剂去除效率。

2.组织切片核酸提取：适用于福尔马林固定石蜡包埋样本，需克服交联作用对回收率的负面影响。

3.唾液与口腔拭子：非侵入性采集样本，需优化去垢剂使用以应对黏蛋白干扰。

4.植物组织核酸提取：针对多糖多酚含量高的样本，需采用CTAB法等特殊试剂保障回收率。

5.细菌培养物提取：适用于革兰氏阳性与阴性菌株，需强化细胞壁破碎步骤提高得率。

6.病毒颗粒核酸提取：聚焦载体RNA保护与蛋白酶K消化环节，确保微量样本回收有效性。

7.环境水样检测：涉及滤膜浓缩与抑制剂去除，需验证低生物量样本的检测限。

8.法医生物检材：处理陈旧或微量样本时，需结合硅胶膜技术最大化回收效率。

9.细胞培养上清液：检测游离核酸时需优化离心参数，避免细胞碎片污染。

10.食品基质提取：针对肉类、谷物等复杂样品，需建立标准添加曲线校正回收率。

检测标准

国际标准：

ISO 22174、ISO 22175、ISO 20391、ISO 15189、ISO 17025、ISO 21571、ISO 22178、ISO 20395、ISO 20186、ISO 20184

国家标准：

GB/T 19495、GB/T 30989、GB/T 37871、GB/T 38504、GB/T 38505、GB/T 34796、GB/T 35580、GB/T 35915、GB/T 36060、GB/T 36692

检测设备

1.紫外分光光度计：通过260纳米与280纳米吸光度测量，同步计算核酸浓度与纯度比值。

2.荧光定量PCR仪：采用标准曲线法绝对定量，验证提取核酸的扩增效率与回收一致性。

3.核酸蛋白分析仪：集成微流控芯片技术，实现皮升级样本的完整性指数自动分析。

4.高速冷冻离心机：提供可控温度与转速，完成细胞碎片分离与核酸沉淀步骤。

5.自动化核酸提取仪：通过磁珠法或硅胶膜法实现高通量处理，减少人为操作误差。

6.凝胶成像系统：捕获电泳条带图像，通过软件分析核酸降解程度与回收质量。

7.涡旋振荡器：确保样本与裂解液充分混合，提高细胞破碎效率与核酸释放率。

8.恒温金属浴：精准控制酶解反应温度，保障蛋白酶K等试剂活性稳定性。

9.超微量分光光度计：适用于微升级样本检测，避免传统方法因稀释导致的测量偏差。

10.生物安全柜：提供无菌操作环境，防止气溶胶污染对回收率测定结果的干扰。

AI参考视频

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

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检测周期：7~15工作日，可加急。

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非标测试：支持定制化试验方案。

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