大肠杆菌检测

关键字:大肠杆菌测试标准
所在栏目:生物检测实验室
发布时间:2025-06-30
信息来源:北检院
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检测项目

微生物计数测试:

  • 菌落计数:CFU/mL测定(参照ISO 16649)
  • 最可能数法:MPN指数计算(≤10个/100mL)
  • 平板计数法:菌落形成单位≥50个
生化鉴定测试:
  • IMViC测试:吲哚阳性、甲基红阳性、V-P阴性、枸橼酸盐阴性
  • 糖发酵测试:乳糖发酵阳性率≥95%(参照API 20E)
  • 尿素酶测试:阴性反应(无颜色变化)
抗生素敏感性测试:
  • 最小抑菌浓度MIC:值范围0.12-256μg/mL(参照CLSI M100)
  • 纸片扩散法:抑菌圈直径≥15mm(如氨苄西林)
  • 梯度扩散法:E-test条带读数
血清学分型:
  • O抗原检测:血清型鉴定(如O157:H7)
  • H抗原检测:鞭毛抗原分析(动力测试阳性)
  • K抗原检测:荚膜抗原测定
分子检测:
  • PCR检测:特定基因扩增(如uidA基因阳性)
  • 实时定量PCR:Ct值≤30(参照ISO/TS 15216)
  • 基因测序:16S rRNA序列匹配度≥99%
毒素检测:
  • 志贺毒素检测:ELISA法OD值≥0.5
  • 肠毒素检测:Western blot阳性条带
  • 热稳定毒素:乳鼠试验阳性
环境适应性测试:
  • 生长温度范围:37°C标准生长(≤45°C存活率)
  • pH敏感性:pH 6-8生长能力(耐酸测试阴性)
  • 盐耐受性:NaCl浓度≤6.5%生长
生物被膜检测:
  • 晶体紫染色法:吸光度≥0.1(参照CV法)
  • 扫描电镜观察:生物被膜厚度≥5μm
  • 黏附能力测试:黏附指数≥50%
致病性评估:
  • 细胞侵袭试验:inv基因表达阳性
  • 动物模型测试:小鼠致死率≥50%
  • 溶血活性:血平板溶血圈直径≥2mm
质量控制测试:
  • 阳性对照:标准菌株ATCC 25922生长验证
  • 阴性对照:无菌水无生长(参照ISO 11133)
  • 培养基验证:pH 7.2±0.2,无菌测试阴性

检测范围

1. 饮用水: 检测大肠杆菌总数和耐热大肠杆菌,重点评估水源污染风险,确保符合微生物限值≤0 CFU/100mL

2. 食品(肉类): 检测生肉和加工制品,重点识别污染源如O157:H7菌株,预防食源性疾病爆发

3. 乳制品: 包括牛奶和奶酪,重点监测巴氏杀菌效果,评估大肠杆菌计数≤10 CFU/mL

4. 环境水样: 如河流和湖泊水,重点检测大肠菌群和大肠杆菌比例,评估水质生态安全

5. 粪便样本: 临床诊断应用,重点鉴定致病性大肠杆菌血清型,辅助腹泻病因分析

6. 制药用水: 纯化水和注射用水,重点检测微生物限度≤100 CFU/mL,确保无菌生产

7. 土壤样本: 环境监测领域,重点评估土壤污染程度,检测大肠杆菌存活率

8. 空气样本: 洁净室和医院空气,重点监测空气传播细菌,评估洁净度等级

9. 化妆品: 如护肤品和洗发水,重点检测微生物污染,确保产品安全限值≤100 CFU/g

10. 动物饲料: 包括家禽和牲畜饲料,重点预防饲料污染传播,检测大肠杆菌计数≤1000 CFU/g

检测方法

国际标准:

  • ISO 16649:2013 食品和饲料中大肠杆菌计数方法(膜过滤法优先)
  • ISO 9308-1:2014 水质检测大肠杆菌和大肠菌群(多管发酵法)
  • CLSI M100 抗生素敏感性测试标准(纸片扩散法差异)
  • ISO/TS 15216:2019 分子检测实时PCR方法(Ct值阈值设定)
国家标准:
  • GB 4789.3-2016 食品微生物学检验大肠菌群计数(平板法与ISO差异)
  • GB 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法微生物指标(最可能数法偏差)
  • GB/T 27405-2008 实验室质量控制指南(培养基验证要求)
  • GB 4789.38-2012 食品中致病性大肠杆菌检验(血清学分型差异)

检测设备

1. 恒温培养箱: Heratherm IGS180(温度范围20-70°C,精度±0.5°C)

2. 自动菌落计数器: ScanFast 500(分辨率1200dpi,计数范围1-5000 CFU)

3. PCR仪: BioRad T100(温度精度±0.1°C,96孔板容量)

4. 显微镜: Olympus CX43(放大倍数40-1000×,油镜配置)

5. 酶标仪: Synergy H1(检测波长200-1000nm,OD值精度±0.01)

6. 离心机: Eppendorf 5424R(转速300-15000rpm,容量1.5-50mL)

7. pH计: SevenCompact S220(测量范围0-14,精度±0.01)

8. 水浴锅: Memmert WB10(温度范围5-100°C,均匀度±0.5°C)

9. 高压灭菌器: Tuttnauer 3870(温度121°C,压力15psi,容量50L)

10. 生物安全柜: Airstream ACG-48(气流速度0.4m/s,HEPA过滤效率99.99%)

11. 分光光度计: UV-1800(波长范围190-1100nm,带宽2nm)

12. 自动稀释仪: Gilson GX-274(稀释比1:10至1:1000,精度±1%)

13. 冷冻干燥机: FreeZone 6(真空度<100mTorr,温度-50°C)

14. 电泳仪: PowerPac HC(电压10-300V,电流0-400mA)

15. 厌氧培养罐: AnaeroJar(氧浓度<1%,催化剂系统)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是关于大肠杆菌检测相关介绍,如果您还有其他疑问,可以咨询在线工程师提交您的需求,为您提供一对一解答。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系,科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广,可参考标准多(国标、企标、通标、工标、国际标准等)。

5、周期短,费用低,方案全。

6、支持定制化试验方案,数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全,团队强,后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断:包括失效分析、科学诊断、数据验证等,可以快速检测出产品问题,尽快止损;

2、其他鉴定服务:协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析;

4、研发使用:试验经验丰富,试验设备多,为科研工作提供数据支持;

3、高校论文:提供研究性实验数据、分析服务,给论文提供科学依据;

5、投标:检测周期短,准确性高,出具的第三方检测报告合法合规;

7、控制材料质量,进行产品内控,降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通,确定具体的试验方案,我方报价;

2、双方签订委托书,我方接收样品;

3、进行细节沟通,我方进行试验测试;

4、试验测试完成,出具检测测试报告;

5、委托完成,我方提供售后服务。

检测流程

检测仪器(部分)

实验仪器

实验仪器-手机

合作客户(部分)

合作客户

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