生物大分子杂质分离纯化测定验证

检测项目

杂质分离效率：

• 色谱分离：分辨率(Rs≥2.0)、收率(≥95%，参照USP<1058>)
• 过滤回收：膜通量(≥50L/m²/h)、杂质截留率(≥99.9%)

纯度评估：

• 电泳分析：主带纯度(≥95%)、杂质带检测限(≤0.05%)
• 色谱纯度：峰面积百分比(主峰≥98%)、梯度洗脱参数(流速0.5-2mL/min)

残余宿主细胞蛋白检测：

• ELISA测定：检测限(≤1ng/mL)、回收率(90-110%)
• 质谱定量：相对丰度误差(±10%)、定量限(≤10ppm)

DNA残留分析：

• qPCR检测：阈值循环数(Ct≤38)、拷贝数(≤10pg/mg)
• 荧光法：荧光强度校正(误差±5%)、检测限(≤0.001ng)

内毒素测定：

• 鲎试剂法：内毒素限值(≤0.25EU/mg)、干扰试验(回收率85-200%)
• 光度法：吸光度线性范围(0.005-0.5EU/mL)、标准曲线R²≥0.98

聚集体监控：

• 尺寸排阻色谱：聚集体含量(≤5%)、单体峰保留时间(RSD≤1%)
• 动态光散射：粒径分布(PDI≤0.2)、Z-均值(10-200nm)

生物活性验证：

• 细胞活性测试：EC50值(偏差±20%)、相对效力(80-120%)
• 酶动力学：Km值(精度±10%)、Vmax测定(RSD≤5%)

方法特异性评估：

• 交叉反应：干扰物响应(≤5%)、基质效应(回收率90-110%)
• 选择性：目标物识别(信噪比≥10)、假阳性率(≤1%)

回收率测试：

• 加标回收：平均回收率(95-105%)、RSD(≤5%)
• 提取效率：溶剂回收率(≥90%)、损失率(≤3%)

稳定性研究：

• 加速稳定性：降解速率(≤5%/月)、效价保留(≥90%)
• 冻融循环：活性损失(≤10%)、杂质增加(≤2%)

检测范围

1.重组蛋白制品：涵盖胰岛素、生长因子等，重点检测宿主细胞蛋白残留及色谱纯度

2.单克隆抗体：包括IgG1/IgG4亚型，侧重聚集体含量分析和片段化监控

3.疫苗产品：涉及病毒载体疫苗和亚单位疫苗，核心检测DNA残留及内毒素限值

4.基因治疗载体：如AAV和慢病毒载体，重点评估载体纯度及残余质粒DNA

5.酶制剂：包括限制性内切酶和聚合酶，强调比活性测定及热稳定性验证

6.抗体药物偶联物：涵盖ADC类药物，侧重药物抗体比率(DAR)精度及小分子杂质

7.细胞治疗产品：如CAR-T细胞，重点监控内毒素及残留培养基成分

8.核酸药物：包括siRNA和mRNA，核心检测核酸纯度及降解产物

9.血浆制品：如凝血因子和免疫球蛋白，强调病毒灭活验证及蛋白质聚集

10.诊断试剂：涉及ELISA试剂盒和PCR试剂，侧重特异性评估及检测限验证

检测方法

国际标准：

• USP<1058>分析方法验证
• ICHQ2(R1)分析程序验证
• EP2.2.46毛细管电泳方法
• ISO10993-1生物相容性测试

国家标准：

• 中国药典2020版9201蛋白质纯度测定
• GB/T37861-2019核酸残留检测方法
• YY/T0686-2017内毒素测试指南
• GB/T38101-2019生物活性测定规范

方法差异说明：ICH与药典在验证参数的接受标准不同，ICH要求精密度RSD≤5%，药典要求≤10%；ISO与GB在内毒素测试中，ISO规定鲎试剂灵敏度0.03EU/mL，GB要求0.05EU/mL；USP与药典在色谱分离分辨率上，USP设定Rs≥2.0，药典为Rs≥1.5。

检测设备

1.高效液相色谱系统：Agilent1260InfinityII(检测限0.01μg/mL)

2.超高效液相色谱仪：WatersACQUITYUPLCH-Class(流速范围0.001-2mL/min)

3.毛细管电泳仪：BeckmanPA800Plus(分辨率≥1.5)

4.SDS-PAGE电泳系统：Bio-RadMini-PROTEANTetra(凝胶浓度4-20%)

5.蛋白质印迹仪：GEHealthcareAmershamImager600(灵敏度0.1ng)

6.酶标仪：ThermoFisherMultiskanSkyHigh(波长范围340-850nm)

7.实时荧光定量PCR仪：RocheLightCycler96(检测限0.001pg)

8.内毒素检测仪：CharlesRiverEndosafeNexgenPTS(范围0.005-50EU/mL)

9.生物活性分析系统：PerkinElmerEnVision(EC50精度±15%)

10.质谱仪：ThermoScientificQExactiveHF(分辨率140,000)

11.动态光散射仪：MalvernZetasizerNanoZS(粒径范围0.3nm-10μm)

12.紫外分光光度计：ShimadzuUV-2600i(波长精度±0.1nm)

13.冷冻干燥机：LabconcoFreeZone6(真空度≤0.1mbar)

14.恒温振荡培养箱：MemmertINCO153(温度范围4-80℃)

15.离心机：Eppendorf5427R(转速30,000rpm)

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是关于生物大分子杂质分离纯化测定验证相关介绍，如果您还有其他疑问，可以咨询在线工程师提交您的需求，为您提供一对一解答。

注意：因业务调整，暂不接受个人委托测试，望谅解（高校、研究所等性质的个人除外）。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系，科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广，可参考标准多（国标、企标、通标、工标、国际标准等）。

5、周期短，费用低，方案全。

6、支持定制化试验方案，数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全，团队强，后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断：包括失效分析、科学诊断、数据验证等，可以快速检测出产品问题，尽快止损；

2、其他鉴定服务：协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析；

4、研发使用：试验经验丰富，试验设备多，为科研工作提供数据支持；

3、高校论文：提供研究性实验数据、分析服务，给论文提供科学依据；

5、投标：检测周期短，准确性高，出具的第三方检测报告合法合规；

7、控制材料质量，进行产品内控，降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通，确定具体的试验方案，我方报价；

2、双方签订委托书，我方接收样品；

3、进行细节沟通，我方进行试验测试；

4、试验测试完成，出具检测测试报告；

5、委托完成，我方提供售后服务。

检测仪器(部分)

合作客户(部分)

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