纳米氧化 copper 细胞毒性测试

关键字:纳米氧化 copper 细胞毒性测试,北检(北京)检测技术研究院,第三方测试机构
所在栏目:食品检测实验室
发布时间:2025-09-01
信息来源:北检院
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检测项目

细胞毒性评估:

  • 细胞活力测试:半数抑制浓度(IC50)、相对增殖率(RGR%,参照ISO10993-5)
  • 膜完整性检测:乳酸脱氢酶泄漏量(LDH释放率≥15%判定毒性)
  • 氧化应激指标:活性氧水平(ROS荧光强度比值)、谷胱甘肽耗竭率
细胞形态学分析:
  • 显微观察:细胞皱缩率、伪足消失程度(放大倍数400X)
  • 凋亡坏死区分:AnnexinV-FITC/PI双染阳性细胞百分比(流式细胞术)
基因毒性筛查:
  • DNA损伤检测:彗星试验尾矩值(Olive尾矩≥5视为阳性)
  • 突变潜能:微核形成率(‰,参照OECD487)
炎症反应测评:
  • 炎性因子释放:IL-6、TNF-α浓度(pg/mL,ELISA法)
  • 细胞因子表达:qPCR检测mRNA上调倍数(阈值循环Ct值差≥2)
代谢功能检测:
  • 线粒体活性:MTT法吸光度值(OD570nm,抑制率计算)
  • ATP含量测定:荧光素酶发光值(RLU下降率%)
吞噬作用评估:
  • 巨噬细胞吞噬率:荧光微球摄入计数(颗粒/细胞)
  • 溶酶体完整性:酸性磷酸酶活性(U/mg蛋白)
屏障功能测试:
  • 单层细胞通透性:TEER值变化(Ω·cm²,下降≥20%为异常)
  • 紧密连接蛋白表达:ZO-1免疫荧光强度量化
长期暴露效应:
  • 克隆形成抑制:集落形成率(CFU%,参照GB/T16886.3)
  • 细胞周期阻滞:G0/G1期细胞百分比(流式细胞术PI染色)
纳米特性关联分析:
  • 粒径依赖性毒性:Z-average粒径与IC50相关性系数
  • 表面电荷影响:Zeta电位与细胞吸附率比值
交叉验证项目:
  • 阳性对照响应:二甲亚砜处理组细胞死亡率(95%置信区间)
  • 阴性对照基线:PBS处理组增殖率(100±5%标准范围)

检测范围

1.球形纳米氧化铜:粒径10-50nm,未修饰型,重点检测细胞吞噬引发的急性毒性

2.棒状纳米氧化铜:长径比3-5,高比表面积,侧重形态依赖的膜损伤效应

3.表面PEG修饰纳米氧化铜:聚乙二醇涂层,检测stealth效应及长期滞留毒性

4.介孔二氧化硅包覆纳米氧化铜:核壳结构,重点评估控释特性及局部炎症

5.掺杂锌纳米氧化铜:Zn-CuO复合物,检测金属离子协同毒性及抗氧化剂缓解效应

6.生物分子偶联纳米氧化铜:叶酸或抗体靶向修饰,侧重特异性细胞摄取及内化途径毒性

7.工业级纳米氧化铜粉末:批量生产样品,检测批次一致性及杂质元素(如Cl⁻)影响

8.医疗植入涂层纳米氧化铜:钛基材表面沉积,重点评估组织界面细胞凋亡及成纤维反应

9.环境模拟介质中纳米氧化铜:血清或肺泡液分散,检测蛋白冠形成后的毒性modulation

10.复合聚合物载药纳米氧化铜:PLGA包裹体系,侧重药物释放协同细胞应激响应

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
  • ASTME2526-08纳米材料细胞毒性试验指南
  • OECD487体外哺乳动物细胞微核试验
  • ISO19007:2018纳米材料细胞吞噬作用测试规范
国家标准:
  • GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
  • GB/T39276-2020纳米材料细胞毒性测定MTT法
  • GB/T40906-2021纳米材料活性氧检测方法
  • GB/T40007-2021纳米材料基因毒性彗星试验
方法差异说明:ISO10993-5优先使用L929细胞系,而GB/T16886.5允许扩展至HepG2等人类细胞系;ASTME2526强调剂量-响应曲线拟合,而OECD487规定最低检测浓度为10μg/mL;ISO19007要求动态光散射预处理,GB/T40906则采用荧光探针DCFH-DA标准化流程。

检测设备

1.倒置荧光显微镜:NikonEclipseTi2-U(物镜放大40X-100X,CCD分辨率2048×2048)

2.酶标仪:BioTekSynergyH1(检测波长200-999nm,温控精度±0.5°C)

3.流式细胞仪:BeckmanCoulterCytoFLEXS(激光488nm/640nm,检测速率35,000细胞/秒)

4.激光共聚焦显微镜:ZeissLSM900(Z轴分辨率0.2μm,共聚焦针孔尺寸1Airyunit)

5.实时细胞分析系统:ACEAxCelligenceRTCA(阻抗检测频率10kHz-100kHz,96孔板并行监测)

6.超高效液相色谱仪:WatersACQUITYUPLCH-Class(压力上限18,000psi,柱温控制4-90°C)

7.原子力显微镜:BrukerDimensionIcon(扫描范围90μm×90μm,力分辨率0.1pN)

8.动态光散射仪:MalvernZetasizerNanoZS(粒径检测范围0.3nm-10μm,Zeta电位精度±0.5mV)

9.荧光光谱仪:HoribaFluorolog-3(激发波长200-850nm,信噪比6000:1)

10.细胞培养箱:ThermoScientificHeracellVIOS(CO₂控制0-20%,湿度波动±1%)

11.微孔板离心机:EppendorfCentrifuge5430R(最大RCF30,000×g,转子适配96孔板)

12.超低温冰箱:PanasonicMDF-U5386S(温度-86°C,波动±3°C)

13.生物安全柜:EscoAirstreamClassII(气流速度0.45m/s,HEPA过滤效率99.99%)

14.实时定量PCR仪:AppliedBiosystemsQuantStudio5(控温精度±0.1°C,通道数6)

15.细胞能量代谢分析系统:AgilentSeahorseXFe96(氧耗率检测分辨率0.5pmol/min)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是关于纳米氧化 copper 细胞毒性测试相关介绍,如果您还有其他疑问,可以咨询在线工程师提交您的需求,为您提供一对一解答。

注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外)。

服务优势

1、拥有完善的检测服务体系,科学、严谨、认证。

2、我院对已出过的报告负责。

3、提供编写MSDS报告、TDS报告服务。

4、检测服务领域广,可参考标准多(国标、企标、JianCe、工标、国际标准等)。

5、周期短,费用低,方案全。

6、支持定制化试验方案,数据更加科学准确。

7、全国上门取样/现场见证试验。

8、资质全,团队强,后期服务体系完善

报告作用

1、工业问题诊断:包括失效分析、科学诊断、数据验证等,可以快速检测出产品问题,尽快止损;

2、其他鉴定服务:协助相关部门证据链补充、证物材料补充、质量检测、样品分析;

4、研发使用:试验经验丰富,试验设备多,为科研工作提供数据支持;

3、高校论文:提供研究性实验数据、分析服务,给论文提供科学依据;

5、投标:检测周期短,准确性高,出具的第三方检测报告合法合规;

7、控制材料质量,进行产品内控,降低成本、风险。

试验流程

1、与工程师沟通,确定具体的试验方案,我方报价;

2、双方签订委托书,我方接收样品;

3、进行细节沟通,我方进行试验测试;

4、试验测试完成,出具检测测试报告;

5、委托完成,我方提供售后服务。

检测流程

检测仪器(部分)

实验仪器

实验仪器-手机

合作客户(部分)

合作客户

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